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人ELISA試劑盒
試劑盒
人白細(xì)胞介素ELISA試劑盒
娜連生物是一家從事“產(chǎn)品研發(fā)、市場(chǎng)銷售、技術(shù)服務(wù)"為一體的生物技術(shù)公司。自公司成立以來(lái),公司的銷售額保持高速增長(zhǎng),企業(yè)規(guī)模不斷擴(kuò)大,銷售的產(chǎn)品包括elisa試劑盒,動(dòng)物血制品,生化試劑盒,抗體,標(biāo)準(zhǔn)品,檢測(cè)卡,生化試劑等實(shí)驗(yàn)耗材等10萬(wàn)余種類,長(zhǎng)期致力于ELISA試劑盒、生物試劑的研發(fā),為客戶提供ELISA試劑盒、生化試劑盒、HPL,人白細(xì)胞介素ELISA試劑盒。
產(chǎn)品分類
產(chǎn)品名稱:人白細(xì)胞介素ELISA試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:96T/盒:zui多可以檢測(cè)90個(gè)樣本;48T/盒:zui多可以檢測(cè)42個(gè)樣本
保存條件:試劑盒2-8℃保存,樣本-80℃保存。運(yùn)輸采用干冰或冰袋
技術(shù)要求:請(qǐng)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作步驟進(jìn)行檢測(cè),操作規(guī)范、儀器設(shè)備齊全
人白細(xì)胞介素ELISA試劑盒使用前將所有試劑置于室溫平衡30分鐘左右,也可置于37℃溫箱快速回溫至室溫。
注意:酶標(biāo)板未恢復(fù)室溫前,請(qǐng)勿開(kāi)封。
下面列出的樣品收集和儲(chǔ)存條件旨在作為一般性指導(dǎo),不同類型樣品的儲(chǔ)存、使用穩(wěn)定性尚未評(píng)估。
血清:使用血清采集管采集全血,室溫靜置待血細(xì)胞凝集后取的血清,或直接在1000×g下離心15分鐘取得血清。操作應(yīng)柔和,避免溶血發(fā)生。獲取的血清應(yīng)及時(shí)進(jìn)行檢測(cè),如不能及時(shí)進(jìn)行檢測(cè),應(yīng)等分為多份,儲(chǔ)存在-20℃及以下溫度條件,儲(chǔ)存時(shí)間不超過(guò)6個(gè)月,冷凍儲(chǔ)存血清樣品凍融不超過(guò)2次。血清樣品建議2倍以上稀釋,例如:50μL樣品+50μL的1×通用稀釋液,稀釋后的血清樣本可在2~8℃儲(chǔ)存不超過(guò)8小時(shí)。建議選取1~2份樣本進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)確定優(yōu)良稀釋度。
血漿:使用EDTA或肝素采血guan收集血漿。全血采集后以1000×g離心15分鐘取得血漿。操作應(yīng)柔和,避免溶血發(fā)生。獲取的血漿應(yīng)及時(shí)進(jìn)行檢測(cè),如不能及時(shí)進(jìn)行檢測(cè),應(yīng)等分為多份,儲(chǔ)存在-20℃及以下溫度條件,儲(chǔ)存時(shí)間不超過(guò)6個(gè)月,冷凍儲(chǔ)存血漿樣品凍融不超過(guò)2次。血漿樣品建議2倍以上稀釋,例如:50μL樣品+50μL的1×通用稀釋液,稀釋后的血清樣本可在2~8℃儲(chǔ)存不超過(guò)8小時(shí)。建議取1~2份樣本進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)確定優(yōu)良稀釋度。
結(jié)果計(jì)算:
建議使用以下方式進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合:
四參數(shù)邏輯(4-P)曲線擬合:以濃度值為橫坐標(biāo),吸光度值為縱坐標(biāo)
建議使用專業(yè)化軟件進(jìn)行結(jié)果擬合和計(jì)算,如ELISACALC、SPSS、Graphpad Prism等。示例數(shù)據(jù)
以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線
注意事項(xiàng):
· 試劑盒內(nèi)所有成分僅供研究使用!
· 終止液含稀硫酸,具有腐蝕性,應(yīng)謹(jǐn)慎操作。
· 試劑盒成分含防腐劑、蛋白成分等,可能引起皮膚過(guò)敏反應(yīng),應(yīng)佩帶口罩避免吸入薄霧。
· 顯色劑、濃縮洗液可能引起皮膚、眼睛和呼吸道刺激,應(yīng)佩帶口罩避免吸入薄霧。
· 佩戴防護(hù)手套、眼睛和面部防護(hù)用品,實(shí)驗(yàn)操作后洗手。
技術(shù)要點(diǎn):
· 不同批次的試劑盒不能混用,不建議將不同板上的微孔板條組裝在一塊板上檢測(cè),盡管是同一批次試劑,也可能存在板與板之間的差異。
· 每次實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)當(dāng)始終配制標(biāo)準(zhǔn)曲線平行檢測(cè),不能將上一次的標(biāo)準(zhǔn)曲線用于下一次實(shí)驗(yàn)結(jié)果的計(jì)算。
· 不要使用超過(guò)有效期的試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。
· 底物顯色劑應(yīng)當(dāng)為無(wú)色,如變藍(lán)表明已變質(zhì),不能應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)。
· 使用適當(dāng)?shù)姆獍迥っ芊馕⒖装鍡l,以便檢測(cè)結(jié)果更加可靠。
· 操作時(shí)盡量避免產(chǎn)生氣泡。不要將不同試劑瓶的瓶蓋交叉使用。
· 應(yīng)當(dāng)遵循說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行實(shí)驗(yàn),不按照說(shuō)明書(shū)的操作將導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的變化,任何不遵循說(shuō)明書(shū)的實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)當(dāng)事先詢問(wèn)售后技術(shù)支持的建議。否則我們不保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠。
參數(shù):
1 | 每孔加入校準(zhǔn)品/待測(cè)樣品50μL,之后每孔再加入一抗抗體50uL。 |
2 | 蓋上封板膜,在37℃下孵育60分鐘,或者室溫置于微孔板振蕩器*上震蕩60分鐘。 |
3 | 洗板5次,最后一次洗板后棄去殘留洗液,倒扣酶標(biāo)板,在干凈的吸水紙上拍干。 |
4 | 每孔加入100μL酶標(biāo)二抗工作液。 |
5 | 蓋上封板膜,在37℃下孵育30分鐘,或者室溫置于微孔板振蕩器*上震蕩60分鐘。 |
6 | 洗板5次,最后一次洗板后棄去殘留洗液,倒扣酶標(biāo)板,在干凈的吸水紙上拍干。 |
7 | 每孔加入100μL顯色液 |
8 | 37℃下避光孵育15**分鐘。 |
9 | 每孔加入50μL終止液。 |
10 | 使用酶標(biāo)儀在450nm檢測(cè)波長(zhǎng)及620~690nm參比波長(zhǎng)條件下測(cè)定吸光度值,如果沒(méi)有參比波長(zhǎng)則僅選擇450nm波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè)。如果最高濃度校準(zhǔn)品OD值過(guò)高,應(yīng)立即在405/630nm雙波長(zhǎng)條件下檢測(cè)。 |
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